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如何克服色譜溶劑檢測干擾?

更新時間:2023-12-12      點擊次數:1149

快速色譜法是純化反應混合物和天然產物提取物的重要工具。現代快速色譜儀器配備了紫外檢測器來觀察洗脫的化合物并觸發其收集。然而,用于分離各種混合物成分的溶劑有時會掩蓋或降低其可檢測性,從而降低其純度和回收率。

那么,你可以做些什么來緩解這個問題呢?

那么,您可以嘗試一些選擇,包括更換溶劑(例如,將乙酸乙酯改為丙酮或 MTBE)或使用能夠實時消除溶劑紫外線吸收(又稱基線校正)的閃蒸系統。兩者都有各自的優點,但本文重點討論基線校正。

Biotage® Selekt 等 Flash 系統提供實時基線校正。該功能消除了運行過程中溶劑造成的任何紫外線吸收,從而使紫外線吸收溶劑無法檢測到的化合物變得對檢測器可見。

例如,靛紅酸酐和芐胺的反應產生了所需的產物和一些副產物。使用 5 克硅膠柱 (Biotage® Sf?r HC) 和庚烷/乙酸乙酯梯度進行快速色譜法僅檢測產品,因為基線隨著乙酸乙酯梯度的增加而上升,圖 1。

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圖 1.使用庚烷/乙酸乙酯梯度純化反應混合物,并使用 UV 檢測,無需基線校正,隱藏了粗反應混合物中的副產物。

為了可視化反應中產生的副產物,啟用系統基線校正功能(通常是默認方法參數)的純化消除了這個問題,圖 2。

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圖 2.啟用基線校正的反應混合物純化揭示了隱藏的副產物。

因此,如果紫外線基線上升導致您出現檢測問題,請考慮具有基線校正功能的閃光系統。



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